客观日本

东京工科大学等开发出安全便捷的电子显微镜样本染色法

2022年06月28日 化学材料

东京工科大学应用生物学部的松井毅教授与东京保健医疗专门职大学康复学部的佐佐木博之教授等人组成的研究团队,成功开发出了新的电子显微镜样本染色法。

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图:用梅耶苏木精对各种细胞和组织进行染色后,再用铅溶液染色的电子显微镜图像。比例尺:(a)3μm,(b、c、d)500nm,(e)10μm

采用醋酸铀的生物样本电子显微镜染色法是在1958年发布的,因操作简单且能获得优良的染色结果,得到了世界各地的电子显微镜设施的使用。然而,由于铀还被用作核武器的材料,国际上对铀化合物的使用、获取、储存和废弃的管制越来越严格,生物学研究领域长期以来一直在等待一种能代替该方法的染色法。

此次研究团队为开发能在电子显微镜的超薄切片法中代替醋酸铀的安全易用的染色法,调查了市售的各种光学显微镜用色素。发现即使是作为光学显微镜的普通染色剂使用的梅耶苏木精和铅溶液的双重染色法,在各种组织和细胞中也具有与以往的醋酸铀溶液和铅溶液双重染色法相同的染色性能。

另外,利用梅耶苏木精-铅染色法,核染色质、细胞膜结构、核糖体、糖原、脂滴、细胞粘附装置和细胞骨架系统等其他细胞器也能以高对比度染色,尤其是所有样本的细胞膜染色性都很好。研究发现,即使是利用电解放射型超高分辨率扫描电子显微镜拍摄的小鼠肾脏200纳米半薄切片背散射电子图像,梅耶苏木精-铅染色法也能以高画质大范围观察到肾皮质的肾小管和肾小球。

由此,梅耶苏木精在试剂的采购、处理、使用、保管和废液处理等方面有望取代采用放射性物质醋酸铀的染色法。

松井教授表示:“计划进一步改良梅耶苏木精染色法,不仅是切片染色,还打算用于在组织片嵌入塑料前进行染色的各种电子显微镜样本的制备阶段。”

【词注】
■梅耶苏木精-铅染色法:通过添加柠檬酸使染色液更加酸性化,可以选择性地对细胞核进行染色,无需用盐酸乙醇等进行分化,是一种不会发生背景共染色的有用染色法。

原文:《科学新闻》
翻译编辑:JST客观日本编辑部

【论文信息】
期刊:Scientific Reports
论文:Novel Electron Microscopic Staining Method using Traditional Dye, Hematoxylin
URL:nature.com/articles/s41598-022-11523-y